Migration Behavior of Immunoglobulin Y in Native Page Electrophoresis

Abstract

Elektroforesis protein dalam keadaan native (Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis, native PAGE) jarang diterapkan pada penelitian. Namun, hasil native PAGE penting untuk mempelajari aktivitas dan interaksi protein. Penelitian ini mempelajari perilaku migrasi imunoglobulin Y (IgY) pada pemisahan menggunakan native PAGE. IgY digunakan karena protein telah dikarakterisasi dengan baik. IgY diisolasi dari kuning telur folikel dan diperiksa dengan Sodium Dodecyl Sulphate(SDS) PAGE reduktif, nonreduktif dan clear native PAGE(CN-PAGE). Elektroferogram SDS-PAGE reduktif menunjukkan pita berukuran ~68 dan 38 kDa yang berturut-turut merupakan rantai berat dan rantai ringan IgY. Elektroferogram SDS-PAGE nonreduktif juga menunjukkan pita IgY berukuran normal~185 kDa dengan kemurnian yang tinggi.Sementara itu, elektroferogram CN-PAGE IgY membentuk pola goresan dengan rentang ukuran protein yang sangat besar yakni ~409 hingga 1048 kDa. Hasil ini memunculkan dugaan adanya agregasi atau oligomerisasi IgY. Dilusi dan disagregasi IgY dengan deterjen natrium dodesil sulfat (NDS), natrium deoksikolat (NDK), sarkosil, urea, dan gliserol tidak mengubah perilaku migrasi IgY pada CN-PAGE. Penelitian ini menyimpulkan IgY tidak membentuk agregat. Perilaku migrasi IgY yang sangat lambat, membentuk pola goresan dan tampak berukuran sangat besar diduga dipengaruhi pI dan konformasi planar dari IgY.